DNA和蛋白质电泳

什么是电泳&如何工作?

电泳是一种实验室技术，用于运输带电的蛋白质分子和核酸通过溶剂使用带电场。它被认为是一种简单、快速、灵敏的分析技术。

许多生物分子在除其等电点以外的任何pH值水平上都携带净电荷，并以与其电荷密度成比例的速率迁移。

分子在电场中的迁移率取决于以下几点:

• 磁场强度
• 分子上的净电荷
• 分子的大小和形状
• 离子强度
• 基质的性质，如孔径和粘度

电泳中使用不同类型的基质，包括聚丙烯酰胺和琼脂糖。它们都是凝胶的一种。作为凝胶基质，聚丙烯酰胺和琼脂糖提供了一种多孔介质，其本质上是一种过滤器。

聚丙烯酰胺的孔径较小，适合分离大量蛋白质和较小的核酸，而琼脂糖的孔径较大，适合分离较大的大分子，如蛋白质复合物和大的核酸。

多种形式的凝胶电泳用于分离核酸和蛋白质，包括聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。单是这种形式就有几个变种，可以提供有关特定蛋白质的各种信息。

例如，变性还原性十二烷基硫酸钠PAGE (SDS-PAGE)用不连续缓冲体系是应用最广泛的电泳和分离技术

主要按质量计算的蛋白质。非变性PAGE (non - denaturing PAGE)也叫天然PAGE，是根据蛋白质的质量/电荷比来分离蛋白质的。二维PAGE在第一个维度按天然等电点分离蛋白质，在第二个维度按质量分离蛋白质。

一旦蛋白质或核酸通过电泳分离，就可以在凝胶基质中使用不同的染色剂进行检测。然后将它们转移到膜上，通过western blotting检测或使用质谱分析。因此，DNA和蛋白质凝胶电泳是蛋白质组学中必不可少的一步。

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