流式细胞计如何工作和我们如何节省时间和金钱

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所有设备品牌/型号均可提供
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流式细胞术是一种广泛用于测量细胞性质的方法,当细胞通过一个由激发光源(激光)、透镜、镜子和过滤器组成的光学系统时,它们被放置在探测器前面。
测量的细胞特征包括细胞表面和细胞内分子的表达,异质细胞群中的各种细胞类型,分离亚群的纯度,以及单细胞的大小和体积。由此产生的发射光子被收集起来,成为确定有关细胞特征的数据。它是生命科学中常用的一种强有力的技术。
这种技术也常用于活细胞上的抗原的高通量测量。在这种情况下没有更好的选择,因为该技术利用抗体或其他蛋白质上的荧光标记,通过激发各种荧光标记来定量检测蛋白质表达的变化。抗体使科学家能够检测到一种特定的抗原,使它们成为在活细胞表面进行蛋白质鉴定的有用工具。
这些抗体可以直接用荧光标记标记,如FITC(荧光素异硫氰酸酯),也可以通过与标记的二抗结合来显示。这使得流式细胞术可以根据多种颜色对细胞进行分析或分类,每种颜色代表由不同抗体结合的不同抗原。
在过去的30年中,单细胞流式细胞术分析已成为在生命科学的许多科学研究人员和临床医生中进行的不可或缺的工具,更具体地说,细胞分析。
不断发展的技术确保了它在许多领域的应用,包括细胞生物学、药物发现、癌症研究、神经科学、干细胞研究、病理学、免疫学、血液学、植物生物学、食品科学和海洋生物学。
FCM组件,数据可视化,样本处理,以及更多

流式细胞仪,有时也被称为细胞分选仪(取决于是否进行细胞分析或细胞分选),由三个主要组成部分组成,它们是收集准确的流式细胞仪数据不可或缺的。
流体系统在流动单元的帮助下,将样品流中的颗粒输送到询问点并带走废料。流动单元是用来帮助液体样品连续流过光束路径的样品单元。这对于任何容易被激发光源损坏的样品特别有用。
该光学系统由一系列滤光片和反射镜组成,将细胞或粒子发出的特定波长的光引导到探测器上,放大单个细胞产生的信号。
然后,电子系统将来自探测器的信号转换成可由计算机处理的电子信号。对于一些配备了分拣功能的仪器,电子系统也能够启动分拣决定,使细胞或粒子充电和偏转。这通常被称为荧光激活细胞分选(FACS)。
流体系统
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分析仪内的流体系统通过激光束的路径对准并在流体流中传输颗粒以进行识别。当将溶液中的样品注入仪器时,各个细胞随机分布在三维空间中。对于准确的数据收集,重要的是每个特定的单元格都通过激光束,每个单元通过单个文件。
大多数流式细胞计通过将样品流注入流动室内的更快流动的鞘流体流,以及附加的流动单元来实现这一点。鞘液的流动加速颗粒并将它们限制在样品芯的中心,从而产生单个颗粒流。该过程称为流体动力学聚焦。
光学系统
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在流体力学聚焦之后,每个粒子通过一束或多束光。激光的激发使荧光试剂结合在细胞或粒子上发出光,根据其特定的波长范围被检测到。光散射,通过前向散射通道(FSC)或荧光发射提供关于粒子性质的信息,而细胞粒度或内部结构复杂性是通过侧散射通道(SSC)提供的。
当使用组合荧光染料时,试剂应具有不同的发射光谱。例如,MACSQuant仪器将使用各种二向色镜和光学滤光片,将特定波长的光引导到相应的荧光探测器。这种排列创造了“荧光通道”。各种滤光片被用来控制哪些波长进入荧光通道。根据它们的光学特性,这些滤波器被称为长通、短通和带通。
- 长传球:阻止光直达某个波长。
- 短路:将光传输到一定的波长。
- 带通:在规定的波长范围内发射光
不同波长的荧光测量可以提供关于荧光色素标记的细胞表面受体或细胞内分子(如DNA和细胞因子)的定量和定性数据。氩离子激光器是最常用的流式细胞仪。这是因为它发出的488纳米光激发出一种以上的荧光色素,而激光和弧光灯是现代流式细胞术中最流行的光源。
电子系统
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一旦一个细胞或粒子通过激光,发射的侧面散射和荧光信号被转移到光电倍增管(pmt)和一个硅光电二极管收集前向散射信号。
所有信号通过镜子和光学滤波器系统路由到它们的光电探测器。光学滤波器通过阻止某些波长来控制检测特异性并传输其他波长。
可视化数据
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为了将采集到的数据可视化,将测量到的每个光学参数值以不同的方式绘制出来。所使用的plot可以是单变量的也可以是双变量的。在流式细胞术中,单变量图用直方图表示,而双变量图用点图表示。
单变量图(直方图)显示一个光学参数,如荧光或光散射,针对事件数量。对于每个事件,每个测量参数的信号强度值都存储在一个数据文件中,随着事件的累积,会生成一条曲线来说明事件根据其各自的信号强度的分布。
另一方面,双变量图(点图)允许在单个图上同时显示两个光学参数。随着越来越多的事件被绘制出来,具有相似强度值的事件聚集在一起。这些细胞群通常代表特定的细胞群。
样品处理
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大多数细胞分选仪器可以利用从几微升到数百微升的样品量。如果你有少量珍贵的细胞,考虑使用基于微流体的流式细胞仪芯片。
微流体的开发,芯片(LOC)技术是对细胞测量术进步的最具创新性和成本效益的方法之一。
自动化
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自动化样本引入分析仪允许在其他分析实验中进行步行电池存活率测定。自动化的增加还允许使用从单个测试管到多孔板的各种格式分析更多的样本。
单管通常包含在矩形网格布置或转盘形式内,以匹配用于样品制备的实验室设备。
Immunophenotyping
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免疫蛋白型只是流式细胞术的许多用途之一,尽管它可能是最常见的。它用于鉴定细胞上的标志物,特别是免疫系统,并允许研究人员和科学家研究细胞表达的蛋白质。
细胞识别是基于存在于细胞表面、核酸酶或细胞质上的标记或抗原,并使用抗体检测每个细胞上的标记(因此“免疫”前缀)来帮助识别细胞谱系。
免疫蛋白型可以像使用单个标记物识别细胞一样简单,或者在一个面板中施加归巢型材,激活状态和细胞因子作为应用。因此,实验方案通常会结合表面和细胞内染色。免疫分型常规用于基础研究以及诊断疾病或监测和评估残留疾病的临床应用。
免疫表型的一些例子包括区分急性髓细胞白血病和淋巴样白血病,以及B细胞和T细胞淋巴样肿瘤,其中包括慢性淋巴细胞白血病和淋巴瘤。该方法也可用于淋巴细胞的反应性和肿瘤性扩张,预测淋巴瘤的预后,以及识别淋巴细胞亚群。
我们租赁各种品牌和型号的FACS机器

不管你是否在寻找显微镜或者是流式细胞仪的解决方案,我们来帮忙。
万博全站登录Excedr提供流式细胞仪模型,如cytoFLEX、s3e细胞分选器、Attune NxT和整个MACSQuant产品线。此外,通过租赁Excedr,您可以获得所需的确切仪器,并为万博全站登录其他关键领域保留更多现金,如雇佣科学家和购买消耗品。
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经营租赁
这种表外融资结构在期末提供了三种选择。承租人有权选择将设备归还给出租人,以折现率续租,或以公平的市场价值购买工具。每月支付的款项也是100%免税,从而产生额外的金钱节省。
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市场上的流式细胞仪制造商及型号
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EMD Millipore:
产品名称:Muse,番石榴流细胞(easyCyte Systems),番石榴流细胞(PCA/ easyCyte Mini Systems), Scepter 2.0
贝克曼库尔特:
Aquios cl,cytoflex,cytomics fc 500,Gallios,Navios,Moflo Astrios EQ,Moflo XDP
Bio-Rad:
ZE5, S3e
BD生物科学:
Accuri C6 Plus, FACSCelesta, FACSVerse, LSRFortessa X-20, FACSCanto II, FACSAria Fusion,, FACS预排序缓冲,FACSAria III, FACSJazz, FACSCalibur, FACSCount, FACSVia, FACSCanto, facsly, FACS Lyse
Miltenyi-Biotec:
MACSQuant分析仪10,MACSQuant VYB, MACSQuant X, MACSQuant Tyto
acea biosciences:
NovoCyte, xCELLigence RTCA系统
Fisher热:
调Nxt
Cytonome:
Viva,Hydris,Gigasort
Sysmex Partec:
Cyflow Cube 6,Cube 6 Max,Cyflow Cube 8,Cube 8 Max,Cyflow Providy,Cyflow Space
索尼生物技术:
Sp6800、sa3800、ma900、sh800、fx500、si8000
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