什么是DCTP？定义和用例

什么是脱氧三磷酸（DCTP）？

2'-脱氧5'-三磷酸（或DCTP）是三磷酸核苷（核苷酸），含有胞嘧啶作为其嘧啶碱。它还具有连接到三个磷酸单元的脱氧核糖糖。它的化学公式为c₉H₁₆n₃o₁₃p₃并具有467.1569 g/mol的分子量。该化合物的CAS数为2056-98-6-该数字由化学摘要服务（CAS）给出，直接参考该化合物的信息。

在双链DNA中，DCTP与DGTP配对，形成三个氢键，而Datp和DTTP通过形成两个氢键来制作一对。因此，链中的GC含量最大程度地提高了结构的稳定性，并确定其物理特性，例如其熔化温度。

其他一些胞嘧啶的衍生物（例如，在亚硫酸盐治疗后产生的甲基化和DUTP形成的5-甲基 - 胞嘧啶）也具有在生物体中执行的基本功能。

亚硫酸盐处理和使用对甲基化敏感限制酶（有或没有甲基化处理）是两种方法，可用于检测基因组DNA中DCTP的甲基化。

本文提供了DCTP及其在实验室和其他生物体中的用途的完整概述。此外，它涵盖了其结构表示及其工作机制。

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DCTP用例和功能

DCTP（包括其他DNTP，例如DATP，DGTP，DCTP和DGTP）在体内和分子生物学实验室内有多种用途。从本质上讲，它们有助于确定生物体代谢功能的工作机制。此外，它们还用于研究生物的演变或任何新物种对特定家族的分类（通过DNA测序）。

DCTP的一些其他用途和功能如下：

在实验室中，DCTP（和其他DNTP）用于测序，克隆，cDNA合成和库制备等测定法中下一代测序。
准备大约100 mm溶液（在水中）DCTP的浓度用于体外PCR，逆转录，RT-PCR，实时PCR，高保真性和DNA标记反应（除其他试剂和消耗品外，包括模板DNA，基因特异性引物对，DNTP混合物，TRIS缓冲液，水，热块循环蛋白和PCR管）。
染料DCTP用于微阵列，原位杂交和吸毒应用程序产生标记的DNA探针。
在生物体中，它用于合成DNA（脱氧核糖核酸）。
它还作为代谢产物参与了几种生物学过程，包括二氢吡啶酶缺乏症，β尿肽酶缺乏症，嘧啶代谢，UMP合酶缺乏症和线粒体神经胃腔静脉穿刺术。

在碳五上修饰的胞嘧啶是重要的表观遗传修饰，有一系列角色。它在生物体中的某些功能是：

修饰的化合物充当十个易位（TET）酶和相关氧化途径的底物。
除了产生完全甲基化的能力外，还可以使用5-甲基-DCTP进行多种生化和细胞功能。
5-甲基-DCTP的溶液在10毫米溶液中在Milli-Q™水中制备，并在260 nm处取吸光度以测量核苷酸浓度。

大多数实验室工作流程中使用的市售DCTP可以存储在-20摄氏度中。还强烈建议参考材料和安全数据表（MSD或SDS），以了解您为实验购买的DCTP核苷酸的质量。

此外，确保数据表突出了这四个素质：

化合物的高稳定性。
纯度等于或超过99％。
使用HPLC测试。
没有人类和大肠杆菌脱氧核糖核酸。

DCTP如何工作？

DCTP包含三种磷酸盐通过磷酸氢键结合在一起。这些高能赤道键释放能量进行水解（在分子之间使用水来打破一个或多个化学键的反应）。

在DNA复制过程中，由于酶，DNA聚合酶的损坏而释放的能量，将DCTP（和其他DNTP）添加到新合成的DNA链中。

（DNA）N + DCTP↔（DNA）N-C + PPI

在DNA合成过程中：

DCTP中存在的焦磷酸键（PPI，其中两个磷原子被排列为P – O – P）。
键的破裂导致核苷单磷酸盐的形成。
核苷单磷酸盐在新形成的DNA的3'端掺入。

DCTP如何与其他DNTP一起合并到DNA中？

DCTP是形成DNA结构（与核糖糖和三磷酸）的四个DNTP（脱氧核苷酸三磷酸）之一。

DNA在5'至3'方向上形成。
所有传入的基础都添加到生长链的3'端。
DNA的3'末端包含一个羟基，并且在遇到传入的三磷酸核苷后，该羟基攻击了磷酸α磷酸基团。
由于3'-OH取代了β和γ磷酸盐，因此从复合物中弹出了焦磷酸分子。
在成长中的女儿链和下一个核苷酸之间形成磷酸二酯键。
然后反应重复，并以相同的方式将随后的氮碱添加到生长的链中。

DCTP结构

DCTP由嘧啶胞嘧啶碱，戊糖糖（脱氧核糖）和三个磷酸基团组成。

它的首选IUPAC名称- IUPAC根据其结构和化学成分给出的化合物的名称是：

[[（（2R，3S，5R）-5-（4-氨基-2-氧吡啶蛋白-1-基）-3-羟基氧氧甲醇-2-基]甲氧基羟基磷酸磷酸磷酸磷酸

数字：脱氧三磷酸（DCTP）的二维结构表示。

CTP（三磷酸细胞二氨酸）不应与DCTP（脱氧三磷酸）混淆。三磷酸细胞磷酸含有羟基的2'位置，而三磷酸脱氧胞苷含有脱氧核糖糖（在其2'Position中仅具有氢原子，而不是羟基的氢原子）。CTP用于RNA的形成，而DCTP用于DNA。

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脱氧三磷酸（DCTP）是由胞嘧啶，脱氧核糖糖和三个磷酸基组成的核苷碱。它涉及形成DNA结构，以及其他氮基碱，包括腺嘌呤，鸟嘌呤和胸腺素。

该分子在几种代谢途径中也充当代谢物，并参与某些疾病。它还在实验室中用于体外分子生物学工作流程，包括PCR，DNA测序以及核苷酸浓度的测定。

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