什么是三磷酸脱氧腺苷?

脱氧腺苷三磷酸。

dATP是什么?

三磷酸脱氧腺苷(dATP)是一种核苷酸,在这两种过程中被用作DNA合成的基石在活的有机体内复制和转录在体外复制技术,如PCR。在结构上,dATP被定义为嘌呤核苷三磷酸;一种与腺嘌呤和3个磷酸(2 ' -脱氧腺苷-5 ' -三磷酸)结合的脱氧核糖糖。

dATP有机化合物分子量为491.1816 g/mol。它由三个亚基组成:一个碱基、一个五碳糖和一个磷酸基。糖的成分是脱氧核糖,用于DNA的组成。RNA中使用的是另一种不同的糖成分核糖。

碱基是一种含氮化合物,可分为两大类:嘌呤和嘧啶。他们参与了核苷和核苷酸

核苷酸是核酸聚合物的单体;核苷是一个磷酸基团。核苷酸中的磷酸基连接两个相邻核苷酸单体的糖环。磷酸基和糖基都是核酸的主干。

dATP是如何合成的?

dATP是用脱氧核糖核酸酶(DNase)从DNA(起始物质)中酶促合成的,脱氧核糖核酸酶(DNase)是一种将DNA分解成更小片段的核酸酶:核酸酶P1、腺苷酸激酶和丙酮酸激酶。dATP合成的一般步骤如下:

  • 合成的第一步是DNA热变性,然后用DNase I处理产生低聚物。
  • 然后用核酸酶P1处理溶液,形成脱氧核苷单磷酸。
  • 腺苷酸激酶和丙酮酸激酶的混合物被用来选择性地将脱氧腺苷一磷酸转化为dATP。
  • 最后一步是对制备好的溶液进行提纯。

dATP是做什么的?

2 ' -脱氧腺苷-5 ' -三磷酸(dATP)是存在于生物体内的五种脱氧核苷酸(dNTPs)之一,包括dTTP(脱氧胸腺嘧啶)、dCTP(脱氧胞苷)、dUTP(脱氧尿苷)和dGTP(脱氧鸟苷)。它们在核酸合成过程中充当底物。

在DNA合成中,dATP与dTTP成对。它还扮演着一个角色大肠杆菌(或大肠杆菌)代谢物和小鼠代谢物。

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dATP是如何工作的?

dATP和其他的dntp,在复制过程中为“解压缩”的单链模板DNA提供核苷酸。在帮助下DNA聚合酶,它们会扩大正在生长的DNA链,以完成其合成。

在DNA合成时,DNA聚合酶共价连接核苷酸链3 '碳上的游离羟基(- oh)基团,与下一个dNTP 5 '碳上的α-磷酸,释放出β-磷酸和γ-磷酸基团作为焦磷酸盐(PPi)。这会在dNTPs之间形成磷酸二酯连接。

dATP在抑制核糖核苷酸还原酶(RNR)中的作用

核糖核苷酸还原酶是一种通过去除核糖环上的2 ' -羟基,催化核糖核苷酸生成脱氧核糖核苷酸的酶。

它有两类:RNR I和RNR II。

RNR I酶受dATP和ATP调控,RNR II酶受GTP和dGTP调控。ATP和GTP激活酶的功能,而dATP和dGTP则是酶的抑制剂。

dATP通过结合核糖核苷酸还原酶的活性位点来调控其活性。的I类核糖核苷酸还原酶大肠杆菌,其抑制作用是由于c位半胱氨酸和酪氨酸自由基辅助因子和2之间的空间增加。这就抑制了还原过程所需活性位点的形成。

在人核糖核苷酸还原酶中,dATP诱导α6结构,抑制核糖核苷酸还原酶的活性。It facilitates the function by preventing subunits from accessing the active site of the of subunit.

你可以用dATP做什么?

商业上可用的dATP在几个方面都有应用在体外生物化学和分子生物学分析以达到预期的最终产品或目标。这是建议查看制造商的MSDS和产品数据表在为您的实验室购买dATP之前。

制造商的文件应突出其产品的以下主要特点:

  • 高稳定性
  • 纯度大于99%(需HPLC确认)
  • 摆脱人类和大肠杆菌DNA

这些指南应该可以帮助您保护您的实验不因低质量的试剂而变质。

dATP与其他试剂一起用于实验室工作流程,包括聚合酶、其他dNTPs、tris缓冲液、SDS和抗体(根据实验类型)。的一些在体外涉及datp的工作流程如下:

  • 用重组酵母poly(A)聚合酶标记RNA的3 '端
  • 3 '端标记寡核苷酸引物
  • 双链DNA 3 '末端的a尾
  • 其他分子生物学应用包括PCR扩增、实时PCR、DNA标记、DNA测序和全基因组扩增

dATP和ATP:有什么区别?

关键的区别

ATP和dATP的主要区别在于ATP是核糖核苷酸,而dATP是脱氧核糖核苷酸。它们在功能上的区别是ATP是细胞的能量货币,是RNA的组成部分,而dATP是DNA合成的前体。

结构上的差异

ATP和dATP的结构差异如下:

三磷酸腺苷

ADP
它是一个磷酸化的核苷酸,由三个磷酸基团和腺苷组成。

它是参与DNA合成过程的两种嘌呤核苷酸之一。

它由一个核糖糖组成,核糖糖在环的2 '位置上有一个羟基。

它由脱氧核糖组成,脱氧核糖在环的2 '位置有一个氢基。

这是一个核苷酸。

这是一个脱氧核苷酸。

ATP(三磷酸腺苷)的分子结构,是一种核糖核苷酸 dATP(脱氧腺苷三磷酸)的分子结构,它是一种脱氧核糖核苷酸
图像: ATP的结构表征。 图像: dATP的结构表示。

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dATP是三磷酸脱氧腺苷,在复制和转录过程中作为核酸合成的前体。在结构上,它由嘌呤氮基(腺嘌呤),脱氧核糖糖和三个磷酸基组成。

dATP与ATP在结构和功能上都不同。ATP在核糖环上有一个2 '羟基,是生物体的能量来源,而dATP没有2 '羟基,而是作为DNA和RNA合成的前体分子。

dATP在许多生物化学和分子生物学实验中都有应用,包括PCR、real-time PCR、全基因组测序等。

配有高质量的实验室级试剂高科技设备是决定实验室使用dATP实验成功的主要因素。无论如何,在研发方面,卓越是没有商量余地的。

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