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什么是PCR机器?

聚合酶链反应(PCR)机器是具有成本效益且高效的工具,用于扩增使用底漆从基因组中选择的小段DNA或RNA。

也称为PCR系统这些设备,热环或热循环器,将核酸复制的原理与互补的核酸杂交结合起来,以指数级产生特定的靶DNA/RNA序列,在几小时内将10 7个因子。

PCR技术,由Kary Mullis发明的,通过将底漆与目标序列结合并使用TAQ聚合酶(Thermus Aquaticus)。常规PCR的基本步骤分为三个阶段,但是存在各种各样的修改。

由于其无处不在和力量,PCR系统是在广泛的研究中被无数的科学家,研究人员和技术人员寻求的,包括病毒感染测试,例如Covid-19的SARS-COV-2病毒,包括COVID-19的大流行。

此外,选择这些机器使生物技术初创公司和企业公司都可以使用它们。

PCR机器做什么?

PCR机器通常称为PCR系统,用于制作数百万个最初的DNA段的副本。

该过程有时也称为“分子影印”。它使科学家可以扩大DNA足以详细研究,从而使其成为临床和研究环境中非常有价值的设备。

需要放大,因为在分子和遗传分析过程中几乎不可能起作用一块DNA。为了将DNA放大到数百万份中,需要放大PCR。

PCR产生的扩增DNA具有多种用途,包括研究遗传疾病,DNA指纹识别以及细菌或病毒的检测。因此,PCR是生物医学研究和犯罪法证的不可或缺的一部分。

它是如何工作的?

如果没有PCR,就无法实现生命科学的研究和进步,因为它已经为许多创新做出了巨大贡献。实际上,它的引入被认为彻底改变了分子生物学,改变了科学家如何研究DNA的发展。它的历史富裕而有影响力,尽管仅在40年前才开发。

聚合酶链反应在五个基本试剂的帮助下,过程分为三个步骤。这些步骤包括:

  • 贬低
  • 退火
  • 扩展/伸长

这五种基本试剂包括:

  • DNA模板
  • DNA聚合酶
  • 底漆
  • DNTP(脱氧核苷酸三磷酸)
  • PCR缓冲液

在执行初始变性后,重复三个主要步骤,直到存在数百万个目标DNA序列的副本。

PCR机器类型

除了PCR的标准方法外,还开发了几种修改。通过更改PCR机器的运行方式,现在可以将它们用于更广泛的应用程序。一些最常见的PCR类型是:

1.常规PCR机器

常规聚合酶链反应用于将目标DNA序列扩增至短时间内,通常仅在2-3小时内。它允许使用聚合酶构建DNA的特定片段来复制细胞遗传材料。

聚合酶与连接到DNA链的底漆一起工作,从而允许合成DNA链的特定部分。以这种方式使用底漆的结果是放大所选的DNA序列,最多数百万或数十亿份。

常规PCR用于许多研究领域,包括医学和诊断研究,法医研究和研究,选择性DNA隔离,DNA的扩增和定量。

2. qpcr

定量PCR(QPCR),也称为实时PCR或RT-PCR,是标准聚合酶链反应的变体,它仅使用一台机器将目标DNA序列的放大与任何给定反应中DNA浓度的定量结合。这是使用荧光检测热环球体完成的。

与常规PCR相比,QPCR通过实时在指数阶段实时检测产品提供了更快的替代方案。感兴趣的荧光染料信号DNA,产生的荧光量取决于存在的DNA量。

有各种可用的实时PCR型号,但它们都具有共同的功能:标准的热循环平台以及激发源(通常是激光或钨灯),用于荧光检测的摄像机以及用于数据处理的计算机和软件。

QPCR可用于病原体的基因分型和定量,MicroRNA分析,癌症检测,微生物负荷测试和GMOS检测。

3.逆转录

逆转录PCR(RT-PCR)是传统聚合酶链反应的一种变体,可扩增靶RNA。PCR之前添加逆转录酶(RT)酶意味着可以扩增和检测RNA靶标。

在RT-PCR期间,RNA分子转化为互补DNA(cDNA)。使用DNA聚合酶将单链cDNA转化为双链DNA。然后可以在PCR反应中使用并扩增所得的DNA分子。

RT-PCR用于基因插入,研究方法,遗传疾病诊断和癌症检测。

4.嵌套

嵌套PCR是PCR的修饰,其中阻止了非特异性结合以提高反应的敏感性和特异性。嵌套的PCR通过将第一组引物与靶DNA的外部结合并放大较大的片段,而第二组引物在连续的PCR反应中专门在目标位点结合。

嵌套的PCR非常适合用于系统发育研究和检测不同病原体。这是由于与常规PCR相比,嵌套PCR带来的灵敏度更高。即使样品包含较低的DNA,嵌套的PCR也可以放大该样品。

5.热门

Hot Start PCR是常规聚合酶链反应的一种新形式,可减少由于室温下非特异性DNA扩增而导致的不希望产物的发生和引物二聚体的形成。

这是通过保持反应的不同元素分开的作用,直到加热后混合物达到变性温度。

与常规PCR相比,热启动PCR通常可以增加产品产量。与常规PCR相比,它还需要更少的努力,并降低了污染的风险。

6.数字(DPCR)

数字PCR设备或DPCR是市场上最准确的设备。它们提供了目标DNA的绝对计数,具有提高的灵敏度,精度和可重复性。数字聚合酶链反应有望破坏各个级别的分子分析技术。DPCR机器有两种类型:

  • 液滴数字PCR(DDPCR):DDPCR使用TAQ聚合酶在复杂样品中扩增靶向DNA。为了简化处理,DDPCR乳化了油中的样品,并使用荧光来处理和分析结果。在分析之前,将样品分为液滴并进行热循环,然后通过96井PCR板运行。这种分离过程是DDPCR和QPCR之间的主要区别
  • QDPCR:QDPCR过程基于集成的流体电路(芯片)。尽管基于芯片的技术的动态范围较窄,但它们提供了极其精确的样品分区和较低的差异。

在检测技术的最前沿,DDPCR和QDPCR是顶级处理机,价格高。幸运的是,租赁更便宜。

PCR机器要多少钱?

PCR机器的成本可能会根据您的需求而变化很大。基本的PCR机器的价格低至5,000美元,而顶级RT-PCR或QPCR系统的价格从15,000美元到90,000美元不等。

它也不止步于此。当您包括PCR机器的隐藏成本(例如运行实验)时,您会发现总成本远远超出了购买价格。由于这些成本在分布多年时就不太明显,因此它们可以产生很大的不同。

因此,请记住不仅要考虑您感兴趣的模型的成本,还要考虑反应的成本。这样做将使您更好地了解PCR机器会随着时间的流逝而花费多少,何时可以打破。

考虑到所有这些,这种定义技术在分子生物学中的高昂成本使得PCR系统对于有限预算的任何设施都无法访问。如果您在市场上购买高端PCR机器并受到预算的限制,则考虑租赁是直接购买的一种选择。

租赁与购买PCR机器

与购买相比,通过Excedr租赁PCR机器有许多优势。万博全站登录这只是一些亮点:

  • 最小化前期费用:付款是100%免税运营费用。这意味着租赁比预先购买的价格要便宜得多。
  • 可管理,灵活的付款:根据您的财务需求,您可以每月或每年支付。拥有可预测的低付款使监控和管理现金流程更简单
  • 包括综合服务计划中的好处:您无需购买或担心年度服务合同。实际上,所有维修和维护均在租赁中涵盖

此外,与其他传统形式的融资(例如银行贷款和信贷额度)相比,租赁更快,直截了当。

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